ANII | Agencia Nacional de Investigación e Innovación

La microscopia in vivo para hacer imagen en profundidad de tejidos ha adquirido gran relevancia y potencial en investigación fundamental y aplicada en ciencias de la vida. En particular, la utilización de láseres infrarrojos pulsados y sintonizables permiten realizar imagenología con confocalidad intrínseca por el proceso de excitación de 2-fotónes. Sin embargo, realizar imagenología en profundidad (deep tissue imaging) plante algunos desafíos propios del tejido donde se realizan los experimentos. En particular son dos las causas más importantes que coartan la penetración de la luz en el tejido, la dispersión y la absorción. Esto se ve relativamente remediado con la iluminación infrarroja dado que el efecto de la dispersión y la absorbancia en el tejido es menor en esta región del espectro de excitación. Otro problema de poder lograr imágenes in vivo en profundidad es la dispersión del pulso en el tiempo y longitud de onda, actualmente este problema se ha solucionado a partir del uso de módulos que corrigen este efecto y logran multiplicar 3-4 veces la eficiencia de excitación en el punto focal sin necesidad de incrementar la potencia del láser. Plantemos entonces la actualización del microscopio Zeiss 880 LSM con un láser MaiTai DeepSee (Spectra-Physics) para desarrollar la microscopia in vivo en animales y expandir así las posibilidades para hacer imágenes intravital, libre de marcación como la autofluorescencia o generación de armónicos, combinación de multifotónica con microscopia hiperespectral; así como todas las herramientas tradicionales de microscopia celular pero con el beneficio de menor fotoblanqueo y fotodaño. Este instrumento permitirá entonces acceder a herramientas en el estado del arte que no son disponible en el país y que posicional al Uruguay como un referente en la imagenología in vivo para investigación en ciencias de la vida.